trizol成分作用是什么

谢谢,近用trizol 提取RNA知道何物,谢谢
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发布于2007-07-05 08:38 最佳答案
收集物材料能即刻进行RNA制备工作若需暂储存则应液氮物材料急速冷冻储存于-80℃冷冻柜制备RNA储存于冷冻柜材料取立即加入液氮研磨式打破细胞先行解冻避免RNase作用

1. 提取组织RNA每50~100mg组织用1ml Trizol试剂组织进行裂解;提取细胞RNA先离沉淀细胞每5-10 ╳106细胞加1ml Trizol反复用枪吹打或剧烈振荡裂解细胞;

2. 述组织或细胞Trizol裂解液转入EP管,室温15~30C放置5钟;

3. 述EP管按照每1ml TRIZOL加0.2ml氯仿量加入氯仿EP管盖用力震荡15秒室温(15℃~30℃)放置2~312000g(2℃~8℃)离15钟;

4. 取层水相置于新EP管,按照每1ml TRIZOL加0.5ml异丙醇量加入异丙醇室温(15℃~30℃)放置10钟,12000g(2℃~8℃)离10钟;

5. 弃按照每1ml TRIZOL加1ml 75%乙醇进行洗涤涡旋混合7500g(2℃~8℃)离5清;

6. 让沉淀RNA室温干燥;
用Rnase-free water 溶解RNA沉淀

参考资料: 生物学实验技术

nikankind

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