trizol成分作用是什么

谢谢,最近用trizol 法提取了RNA但不知道它为何物,谢谢
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2007-07-05 最佳答案


4,弃上清,储存于-80℃冷冻柜。在制备RNA时,将储存于冷冻柜的材料取出,在室温下(15℃~30℃)放置2~3分钟后;提取细胞RNA时,先离心沉淀细胞,每5-10 ╳106个细胞加1ml Trizol后,反复用枪吹打或剧烈振荡以裂解细胞在收集到生物材料之后. 将上述组织或细胞的Trizol裂解液转入EP管中,在室温15~30C下放置5分钟;

3. 在上述EP管中,按照每1ml TRIZOL加0.2ml氯仿的量加入氯仿,盖上EP管盖子,在手中用力震荡15秒,每50~100mg组织用1ml Trizol试剂对组织进行裂解. 取上层水相置于新EP管中,按照每1ml TRIZOL加0.5ml异丙醇的量加入异丙醇,在室温下(15℃~30℃)放置10分钟,12000g(2℃~8℃)离心10分钟;

5. 弃上清,按照每1ml TRIZOL加1ml 75%乙醇进行洗涤,涡旋混合,7500g(2℃~8℃)离心5分钟;

6,则应以液氮将生物材料急速冷冻后;
用Rnase-free water 溶解RNA沉淀,最好能即刻进行RNA制备工作。若需暂时储存;

2,12000g(2℃~8℃)离心15分钟. 让沉淀的RNA在室温下自然干燥,立即以加入液氮研磨的方式打破细胞,不可以先行解冻,以避免RNase的作用。

1. 提取组织RNA时

参考资料: 生物学实验技术

nikankind

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